產品名稱：康為世紀 金牌無內毒素質粒大提試劑 負壓法

產品貨號：CW2107M

英文名稱：GoldVac EndoFree Plasmid Maxi Kit

產品規格：10 preps

產品介紹：

內毒素是質粒提取中常見的污染物，由于真核細胞對內毒素非常敏感，因此，如果質粒中含有內毒素會大大降低真核細胞轉染效率。本試劑盒提供一種快速、易大規模質粒制備的新方法。每次可處理100-300 ml菌液，獲得多至2 mg轉染級質粒DNA。使用真空裝置可同時純化多個樣本，45分鐘即可完成質粒提取，有效減少手動操作時間。特殊的緩沖液系統和除內毒素過濾器，有效去除內毒素、基因組DNA、RNA、蛋白等雜質。本試劑盒所得質粒純度高、提取量大，特別適用于細胞轉染，同時也可用于DNA測序，PCR，體外轉錄，內切酶消化等實驗。

產品組份：

產品特點：

1.提取速度快:利用真空裝置，40分鐘內快速純化多個樣本，有效減少手動操作時間

2.提取得率高:可從100-300 ml菌液，獲得多至2 mg轉染級質粒DNA。

3.產品品質高:提取的質粒DNA適用于大多數細胞株的高級轉染實驗。

配套試劑：

無水乙醇、異丙醇、真空泵、廢液收集裝置、真空純化裝置。

產品使用說明：

1．取100-300 ml過夜培養的菌液，加入離心管（自備）中，12,000×g離心2-3分鐘收集細菌，盡量吸棄全部上清。

2．向留有菌體沉淀的離心管中加入12 ml Buffer P1（請先檢查是否已加入RNase A），使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮細菌沉淀

3．向離心管中加入12 ml Buffer P2，溫和地上下顛倒混勻8-10次，使菌體充分裂解，室溫放置3-5分鐘。此時溶液應變得清亮粘稠。

4．向離心管中加入12 ml Buffer E3，立即上下顛倒混勻8-10次，此時出現白色絮狀沉淀，室溫放置5分鐘。將溶液全部倒入除內毒素過濾器中，慢慢推動推柄過濾，濾液收集在干凈的50 ml離心管中。

5．向濾液中加入0.3倍濾液體積的異丙醇，上下顛倒混勻

6．正確連接負壓裝置，將連接管與DNA吸附柱連接好后插到負壓裝置的插口上

7．柱平衡：向DNA吸附柱中加入2 ml Buffer PS，開啟并調節負壓至-300~-700 mbar，吸去柱上溶液。

8．將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉移到平衡好的吸附柱中，吸去柱上溶液。

9．向DNA吸附柱中加入10 ml Buffer PW吸去柱上溶液。

10.保持負壓抽吸10分鐘，除去吸附膜內殘留漂洗液，干燥吸附膜。若一次抽吸6個樣品以上，可將負壓抽吸時間適當延長。待吸附膜徹·底干燥后，關閉負壓開關。

11.將壓力恢復至0 mbar時，取下吸附柱，將DNA吸附柱置于一個新的50 ml離心管中，向吸附膜的中間部位加入1-3 ml Endo-Free Buffer EB，室溫放置2-5分鐘，12,000×離心5分鐘，將質粒溶液收集到離心管中。-20℃保存質粒。

保存條件：

室溫 (15-30℃)

產品訂購信息：

品牌             貨號                   名稱                                                規格

康為世紀    CW2107S       金牌超量無內毒素質粒大提試劑盒       2 preps

關于公司：

康為世紀生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學領域，有自主知識產權的國家高新技術企業，主要從事高附加值、高技術含量的生物試劑的研發與生產，為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創新型生物產品和服務。公司曾先后被評為國家高新技術企業、江蘇省科技型中小企業、江蘇省瞪羚企業、江蘇省民營科技企業。公司建立了專業化、集約化、能夠形成自主知識產權的技術創新體系和開放式的合作創新平臺，構建成了公司完整的研發創新體系。

產品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護劑、核酸提取試劑盒、分子診斷檢測試劑等，打破了中國生物研究與產業對進口試劑的依賴。