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NGS文庫DNA擴增高保真熱啟動聚合酶預混液

KAPA HiFi HotStart ReadyMix是一種DNA擴增預混液，包含引物和模板之外擴增*反應必需成分。預混液所含KAPA HiFi DNA Polymerase是新型改造B族DNA聚合酶，錯誤率比野生型Taq DNA聚合酶低約100倍，成功率和產率比野生型B族proofreading活性的DNA聚合酶更高。適用于NGS文庫。

KAPA HiFi HotStart ReadyMix高保真DNA聚合酶預混液

英文名稱：KAPA HiFi HotStart ReadyMix

中文名稱：KAPA HiFi高保真熱啟動DNA聚合酶預混液

品牌：KAPA

用于克隆和蛋白質表達或基因組表征的DNA核酸片段的擴增，高保真PCR，新一代測序NGS文庫擴增，定點突變。

聚合酶預混液DNA擴增特點

高DNA親和力，無需輔助蛋白和DNA結合結構域

高持續合成能力

長片段擴增能力

選擇失活，低非特異性擴增

KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶是一種新型B家族DNA聚合酶，經過工程改造后對DNA的親和力增加，不需要輔助蛋白或DNA結合域。與野生型B家族DNA聚合酶相比，該酶固有的高持續合成能力可顯著提高合成產量，速度和靈敏度。此外，擴增長片段以及富含GC和AT片段的能力顯著提高。該酶與*抗體結合，*次變性步驟之前可以保持失活狀態。這可以防止反應過程中的非特異性擴增，提高靈敏度，并提高反應效率。

KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase is a novel B-family DNA polymerase, engineered to have increased affinity for DNA, without the need for accessory proteins or DNA binding domains. The intrinsic high processivity of the enzyme results in significant improvement in yield, speed and sensitivity when compared with wild-type B-family DNA polymerases. In addition, the ability to amplify long targets, as well as GC- and AT-rich targets, is significantly improved. The enzyme is combined with a proprietary antibody that inactivates the enzyme until the first denaturation step. This prevents nonspecific amplification during reaction setup, increases sensitivity, and improves reaction efficiency.

組份（除引物和模板的擴增反應液）

DNA聚合酶+緩沖液混合：

DNA聚合酶：0.5U /25μL反應

緩沖液：dNTPs（每種dNTP 0.3mM，1X），MgCl₂（2.5mM，1X ）和穩定劑

高保真熱啟動聚合酶技術參數

聚合酶種類：改造B族DNA聚合酶

聚合酶活性：KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶具有5'g3'聚合酶和3'g5'核酸外切酶（proofreading）活性，但沒有5'g3'核酸外切酶活性。

擴增片段長度：可從基因組DNA中擴增高達15kb的目標或從較不復雜的目標擴增20kb。

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預混液設計用于各種目標和大小片段的常規高保真PCR。它的錯誤率比野生型Taq DNA聚合酶低約100倍，成功率和產率比野生型B家族（proofreading）DNA聚合酶更高。另外，KAPA HiFi HotStart比野生型B家族DNA聚合酶需要更短的反應時間。 KAPA HiFi HotStart DNA聚合酶具有5'g3'聚合酶和3'g5'核酸外切酶（proofreading）活性，但沒有5'g3'核酸外切酶活性。

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KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預混液應用

KAPA HiFi熱啟動PCR試劑盒非常適合：

用于常規測序的PCR（直接測序或克隆PCR產物的測序）

新一代測序文庫擴增（與KAPA文庫擴增方案配合使用時）

擴增DNA核酸片段用于克隆和蛋白質表達或基因組表征

定點突變

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預混液產生的DNA核酸片段可用于常規下游分析和應用，包括限制性內切酶消化，克隆和測序。KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預混液產生的PCR產物是平端的，但可以加3'-dA-尾以克隆到TA載體中。

Quick Notes

• KAPA HiFi HotStart ReadyMix PCR Kits contain the engineered KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase –developed for fast and versatile high-fidelity PCR.

• Buffer, MgCl2 , dNTPs and enzyme are supplied in a convenient 2X ReadyMix – just add primers and template.

• KAPA HiFi HotStart DNA Polymerase has the lowest published error rate of all B-family DNA polymerases (1 error per 3.6 x 106  nucleotides incorporated).

• Amplify targets up to 15 kb from genomic DNA or 20 kb from less complex targets.

• Denature at 98°C for 20 sec per cycle.

• Optimal annealing temperatures are typically higher than in other PCR buffer systems. Use an annealing temperature gradient to determine the optimal annealing temperature.

• To ensure the highest fidelity, use high quality DNA and the lowest possible number of cycles.

KAPA Biosystems是一家美國生物公司，成立于2006年，其生產基地位于南非開普敦。KAPA Biosystems致力于研發、生產下一代PCR（Next-Generation PCR）所需的生物酶。目前其分子進化平臺開發的產品已被廣泛應用于DNA擴增、二代測序、分子診斷等領域。

KAPA HiFi高保真DNA聚合酶預混液訂購信息

KK2600（） KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 0.25 mL

KK2601（） KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 1.25 mL

KK2602（ ）KAPA HiFi HotStart ReadyMix (2X)* 6.25 mL

* Contains 2.5 mM MgCl₂ at 1X

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