產品名稱：BD Pharmingen IMag 磁珠細胞分離系統試劑Anti-Mouse CD4 Magnetic Particles - DM  (RUO)

產品貨號：551539

產品規格：

品牌

   BD IMag™

Clone

   GK1.5""

Alternative Name

   Cd4; CD4 antigen; L3T4; Ly-4; T-cell surface antigen T4/Leu-3

Isotype

   Rat LEW, also known as Lewis IgG2b, κ

反應性

鼠 (QC Testing)  

應用領域

   Cell separation (Routinely Tested)

免疫原

   Mouse CTL clone V4

Entrez Gene ID

   12504

Storage Buffer

   Aqueous buffered solution containing BSA and ≤0.09% sodium azide.

監管資質級別

   RUO

產品介紹：

BD IMag™抗小鼠CD4顆粒是一種磁性納米顆粒，其表面結合有單克隆抗體。使用BD-IMag對這些顆粒進行了優化，以選擇或清除CD4攜帶的白細胞™ 電池分離磁鐵。據報道，CD4（L3T4）分化抗原在大多數胸腺細胞、成熟T淋巴細胞亞群（即MHCⅡ類限制性T細胞，包括大多數T輔助細胞）和NK-T細胞亞群中表達。此外，CD4在多能干細胞、骨髓和B淋巴細胞前體、胸腺內淋巴細胞前體和脾臟樹突狀細胞亞群中也被檢測到。準備和儲存

在4℃下未稀釋保存。通過親和層析從組織培養上清或腹水中純化單克隆抗體。在*條件下，將抗體或鏈霉親和素與磁性粒子結合，去除未結合的抗體/鏈霉親和素。

產品通知單

BD圖像™ 粒子由羧基功能化磁性粒子制備，該磁性粒子由Skold技術制造，并獲得美國轉利號7169618的許可。

注意：疊N化鈉在酸性條件下產生高毒性的疊氮酸。丟棄前，在自來水中稀釋疊氮化合物，以避免管道中積聚潛在爆炸性沉積物。

所有血清蛋白來源于美國農業部檢測的位于美國的屠宰場。

白細胞被BD-IMag標記™ 抗小鼠CD4顆粒-糖尿病根據磁標記協議。這個標記的細胞懸液隨后被放置在BD-IMag的磁場中™ 電池分離磁鐵（類別。第552311號）。有標記的細胞移向磁鐵（正部分），使未標記的細胞處于懸浮狀態，這樣它們就可以被吸出（負部分）。然后將管子從磁場中取出，使正的部分再懸浮。將分離重復兩次以提高正餾份的純度。磁選流程圖中給出了磁選步驟。在陽性組分被洗滌后，小尺寸的磁性顆粒允許陽性組分在下游應用（如流式細胞術）中進一步評估。

磁標記協議

一。根據標準實驗室程序，從感興趣的淋巴組織制備單細胞懸液。將懸浮液通過一個70μm的尼龍濾器，去除細胞團和/或碎片。

2。稀釋BD-IMag™ 緩沖器（10X）（類別。編號552362）1:10，用無菌蒸餾水或制備1X BD IMag™ 用0.5%牛血清白蛋白、2毫米乙二胺四乙酸和0.09%疊N化鈉補充磷酸鹽緩沖液。放在冰上。

盡管我們的經驗表明使用鼠標BD Fc塊™ 純化抗小鼠CD16/CD32單抗2.4G2（貓。第553141/553142號）不是*細胞分離所必需的，一些實驗室可能希望在他們的研究中使用它。

如果添加鼠標BD Fc塊™，繼續執行步驟3。如果不添加鼠標BD Fc塊™，繼續執行步驟4。

三。添加鼠標BD Fc塊™ 在0.25μg/10e6細胞上，在冰上培養15分鐘。

四。用至少等體積的1X BD IMag清洗電池™ 緩沖液，仔細吸取所有上清液。

5個。旋轉BD IMag™ *抗小鼠CD4磁性顆粒-DM，每10e7個細胞添加50微升顆粒。

6。充分混合。在6℃-12℃下冷藏30分鐘。

7號。帶上BD IMag™-顆粒標記體積高達1-8 x 10e7個細胞/毫升，帶有1個BD-IMag™ 緩沖，然后立即將試管放在電池分離磁鐵上。室溫下孵育6-8分鐘。

8個。將試管放在細胞分離磁鐵上，小心地吸出上清液。這個上清液含有負的部分。

9號。從電池分離磁鐵上取下管子，并添加1X BD IMag™ 緩沖到與步驟7相同的卷。輕輕地用移液管吸幾次細胞，然后將試管放回細胞分離磁鐵上再吸2-4分鐘。

10個。將試管放在細胞分離磁鐵上，小心地吸出上清液并丟棄。

11號。重復步驟9和10。

12歲。在后的清洗步驟之后，將陽性部分重新放入適當的緩沖液中，并以適當的濃度進行進一步分析。

注意：避免非特異性標記，快速工作并遵守建議的孵育時間。

產品名稱：BD品牌 磁珠細胞分離系統試劑 小鼠CD4抗體        產品貨號：551539

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