人間充質干細胞培養基已經發展到了第三代

*代 培養基+牛血清

第二代 培養基+牛血清替代品：人血清、血小板裂解液和臍帶血清

第三代 無血清、無動物源、成分確定的培養基

第三代人間充質干細胞培養基不含牛血清或人血清之類的血清替代品，無動物源而且成分確定，免除了異種血清帶來的病原體污染風險，批次穩定，適合干細胞治療的臨床研究。

HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人間充質干細胞無血清培養基

中文名：HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人間充質干細胞無血清培養基

英文名：HY STEMCELL CCGmHuM^TM  Human MSCs Growth Medium

HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人間充質干細胞無血清培養基是成分確定、無血清、無異源物，無需鋪板膠的*培養基。適用臍帶或脂肪來源的人間充質干細胞的原代培養擴增。培養的hMSC可傳多代。

特點

Serum-free 無血清成分

Xeno-free 無異種蛋白

Chemically-defined 化學成分明確

NO plate coating necessary 無須昂貴的鋪板蛋白

Perform better than FBS medium 生長分化優于血清培養基

組份

HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人間充質干細胞無血清培養基包括【Basal Medium 基礎培養基】 和 【Supplement Medium 細胞因子添加物】兩部分。基礎培養基中添加HEPES和L-谷氨酰胺。細胞因子添加物中含有多種細胞生長因子、粘附蛋白、轉鐵蛋白、胰島素、微量元素和人白蛋白等成分。

培養表現

使用HY StemCell CCGmHuM^TM 人間充質干細胞無血清培養基培養人臍帶間充質干細胞，傳到第7代，MSC形態功能維持良好。

應用

適用于原代培養臍帶或脂肪組織來源的人間充質干細胞。

培養條件

培養基：*培養基

細胞系：臍帶或脂肪組織來源的人間充質干細胞

細胞類型：貼壁

儲存

基礎培養基保存在2～8℃。細胞因子添加物保存在–20°C。

使用注意

為保障活性，建議把【Supplement Medium 細胞因子添加物】一次解凍后分裝再凍存，不宜反復凍融。

訂購信息

歡迎您致電 華雅再生醫學旗艦公司：紅榮微再（上海）生物工程技術有限公司  ：152 1681 4001。紅榮微再-客服: 316 808 6348  經銷商專員

背景知識

一 人間充質干細胞培養基的發展

人間充質干細胞的來源

從1970年發現以來，脂肪組織、胎盤、牙髓、滑膜、外周血、牙周韌帶、子宮內膜、臍帶和臍帶血中都有研究發現間充質干細胞[1]，不過應用比較多的來源還是骨髓、脂肪和臍帶組織中的間充質干細胞[2]。目前，異體間充質干細胞密度zui高來源是臍帶，每毫升zui高能獲得470萬個MSC，而自體間充質干細胞密度zui高來源是脂肪組織，每毫升zui高能獲得155萬個MSC[3]。HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人間充質干細胞無血清培養基就是適用臍帶和脂肪組織來源的hMSC培養。

人間充質干細胞的培養發展[4]

人間充質干細胞的下游應用是組織修復等疾病治療，因此它的培養要滿足醫用的高標準。隨著臨床應用的成熟，間充質干細胞培養基也經歷了從有血清到無血清培養基的轉變。

有血清培養基一開始使用的是胎牛血清，胎牛血清是天然產品，批次間差異大，影響實驗穩定性，尤其還是異源物，會有病原體污染風險和免疫影響，不利治療安全，需要額外監管。于是越來越多的血清培養基選擇了自體或同源異體的人源血清作為培養基添加物，包括人血清、血小板裂解液和臍帶血清。

低血清或人源血清仍然不夠穩定，也不能*免除病原體的污染風險，隨之興起的是成分確定的無血清培養基。無血清培養基用重組人蛋白代替血清中的天然蛋白，以此來消滅異種蛋白輸入人體可能會引起的免疫抗體反應。比如血清中zui基礎的白蛋白、轉鐵蛋白和胰島素，無血清培養基都改用重組人轉鐵蛋白和重組人胰島素代替，而不是提取天然產物。無血清培養基發展中，確定了多種生長因子是人間充質干細胞擴增必須添加的。HY STEMCELL CCGmHuM^TM 人間充質干細胞無血清培養基細胞因子添加物中含有多種細胞生長因子、粘附蛋白、轉鐵蛋白、胰島素、微量元素和人白蛋白等成分。

二 人類間充質干細胞的分離與原代培養方法[5]

新生兒臍帶間充質干細胞分離與原代培養

新生兒臍帶組織剝取華通氏膠，以組織塊培養法或酶消化法分離新生兒間充質干細胞，

貼壁法做原代培養。

新生兒臍帶血來源間充質干細胞分離與原代培養

新生兒臍帶血樣本，與磷酸緩沖液 1:1 稀釋后，以密度梯度離心法分離單個核細胞，貼

壁法培養。定期更換培養基直到貼壁生長的成纖維細胞樣的細胞達到匯合。

新生兒胎盤間充質干細胞分離與原代培養

剝取胎盤羊膜、絨毛膜或絨毛組織，以酶消化法分離胎盤間充質干細胞，貼壁法做原代

培養。

人類脂肪間充質干細胞分離與原代培養

成人脂肪組織，以酶消化法分離脂肪間充質干細胞，貼壁法做原代培養。

人類牙髓間充質干細胞分離與原代培養

牙齒樣本，完整剝離牙髓，以酶消化法分離牙髓間充質干細胞，貼壁法做原代培養。

人類骨髓間充質干細胞分離與原代培養

人骨髓液樣本，以密度梯度離心法分離骨髓間充質干細胞，貼壁法作原代培養。

人類宮內膜間充質干細胞分離與原代培養

宮內膜組織樣本以酶消化法分離子宮內膜干細胞，并做原代培養。或

人羊水來源間充質干細胞分離與原代培養

人羊水樣本，100 目濾器過濾后離心，棄上清。以培養液重懸細胞沉淀，貼壁法培養。

定期更換培養基直到貼壁生長的成纖維細胞樣的細胞達到匯合。

人類母乳來源間充質干細胞分離與原代培養

人類母乳樣本，100 目濾器過濾后離心，棄上清。以培養液重懸細胞沉淀，貼壁法培養。

定期更換培養基直到貼壁生長的成纖維細胞樣的細胞達到匯合。

人類滑膜來源間充質干細胞分離與原代培養

人類滑膜組織樣本，以酶消化法分離滑膜間充質干細胞。離心洗滌后，貼壁法培養。定

期更換培養基直到貼壁生長的成纖維細胞樣的細胞達到匯合。

三 人臍帶間充質干細胞[6]

圖源網絡：臍帶和華通氏膠

人臍帶內、臍血管周圍含有豐富的基質即華通膠，膠內含有大量間充質干細胞——人臍帶華通膠間充質干細胞（human umbilical cord Wharton′s jellyderived mesenchymal stem cells，hWJ-MSC），該干細 胞能夠穩定表達間充質干細胞*的分子標記物。 近幾年，hWJ-MSC 已成為干細胞治療領域理想的種 子細胞。其高表達 CＤ54、CＤ146 等生長因子，提示其具有高度增殖分化潛能，同時 hWJ-MSC 通過分泌相關因子或者通過細胞與細胞間直接接觸調節單核 細胞、巨噬細胞等免疫細胞的免疫功能。基于 hWJMSC 取材方便、來源廣泛、增殖分化潛能高、免疫原性低等特點，hWJ-MSC 的相關研究已經從zui初的體 外細胞實驗發展到體內動物實驗，更有學者已經將 hWJ-MSC 應用到了臨床實驗中。

參考文獻

1 FENG-JUAN LV et al.Concise Review: The Surface Markers and Identity of Human Mesenchymal Stem Cells.2014.

2 Marcin Majka et al.Concise Review: Mesenchymal Stem Cells in Cardiovascular Regeneration: Emerging Research Directions and Clinical Applications.2017.

3 C. ThomasVangsness Jr. et al.Umbilical Cord Tissue Offers the Greatest Number of Harvestable Mesenchymal Stem Cells for Research and Clinical Application: A Literature Review of Different Harvest Sites.2015.

4 Dolly Mushahary et al.Isolation, C*tion, and Characterization of Human Mesenchymal Stem Cells.2017.

5 SZDB/Z 126 2015《人類間充質干細胞庫建設與管理規范》

6 何蓓 等.人臍帶華通膠間充質干細胞的生物學特性及研究新進展.2016.

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